本标准适用于油脂中PG的测定。
1 原理
样品经石油醚溶解,用乙酸铵水溶液提取后,没食子酸丙酯(PG)与牙亚铁酒石酸盐起颜色反应,在波长540nm处测定吸光度,与标准比较定量。
2 试剂
2.1 石油醚:沸程30~60℃。 2.2 乙酸铵溶液:10%及1.67%乙酸铵水溶液。 2.3 显色剂:称取0.100g硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)和0.500g酒石酸钾钠(NaKC4H4O6.4H2O),加水溶解,稀释至100ml。临用时配制。 2.4 PG标准溶液:精密称取0.0100gPG溶于水中,移入200ml容量瓶中,并用水稀释至刻度。此溶液每毫升含50μgPG。
3 仪器
分光光度计。
4 操作方法
4.1 样品处理 称取10g样品,用100ml石油醚溶解,移入250ml分液漏斗中,加20ml1.67%乙酸铵溶液振摇2min,静置分层,将水层放入125ml分液漏斗中(如乳化,连同乳化层一起放下),石油醚层再用20ml、20ml1.67%乙酸铵溶液重复提取两次,合并水层。石油醚层用水振摇洗涤两次,每次15ml,水洗液并入同一125ml分液漏斗中,振摇、静置。将水层通过干燥滤纸滤入100ml容量瓶中,用少量水洗涤滤纸,加入2.5ml10%乙酸铵溶液,加水至刻度,摇匀,将此溶液用滤纸过滤,弃去初滤液的20ml, 收集滤液供比色测定用。 4.2 测定 精密吸取20ml上述处理后的样品提取液于25ml具塞比色管中,加入1ml显色剂,加4ml水,摇匀。 另精密吸取0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10mlPG标准溶液(相当0、50、100、200、300、400、500μgPG), 分别置于25ml带塞比色管中, 加入2.5ml10%乙酸铵溶液, 准确加水至24ml, 加入1ml显色剂, 摇匀。 用1cm比色杯, 以零管调节零点, 在波长540nm处测定吸光度, 绘制标准曲线比较。 4.3 计算 A × 1000 X = ───────────── m × V2/V1 × 1000×1000 式中:X──样品中PG的含量,g/kg; A——测定用样液中PG的含量,μg; m—─样品质量,g; V1——提取后样液总体积,ml; V2——测定用吸取样液的体积,m1。
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