本标准适用于油脂中BHT的测定。
1 原理
样品通过水蒸气蒸馏，使BHT分离，用甲醇吸收，遇邻联二茴香胺与亚硝酸钠溶液生成橙红色，用三氯甲烷提取，与标准比较定量。
2 试剂
2.1 无水氯化钙。
2.2 甲醇。
2.3 50%甲醇。
2.4 三氯甲烷。
2.5 邻联二茴香胺溶液：称取125mg邻联二茴香胺于50ml棕色容量瓶中，加25ml甲醇，振摇使全部溶解,加50mg活性炭,振摇5min过滤，取20ml滤液，置于另一50ml棕色容量瓶中，加1N盐酸至刻度, 临用时现配并避光保存。
2.6 0.3%亚硝酸钠溶液：避光保存。
2.7 BHT标准溶液：精密称取0.050gBHT，用少量甲醇溶解，移入100ml棕色容量瓶中，并稀释至刻度，避光保存。此溶液每毫升相当于0.5mgBHT。
2.8 BHT标准使用液临用时吸取1.0mlBHT标准溶液，置于50ml棕色容量瓶中，加50%甲醇至刻度，混匀，避光保存。此溶液每毫升相当于10μgBHT。
3 仪器
3.1 水蒸气蒸溜装置。
3.2 甘油浴。
3.3 分光光度计。
4 操作方法
4.1 样品处理
称取2～5g样品(约含0.4mgBHT)于100ml蒸馏瓶中，加16g无水氯化钙粉末及10ml水,当甘油浴温度达到165℃恒温时，将蒸馏瓶浸入甘油浴中,连接好水蒸气发生装置及冷凝管。冷凝管下端浸入盛有50ml甲醇的200ml容量瓶中，进行蒸馏，蒸馏速度每分钟1.5～2ml,在50～60min内收集约100ml馏出液(连同原盛有的甲醇共约150ml，蒸气压不可太高，以免油滴带出)，以温热的甲醇分次洗涤冷凝管，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度。
4.2 测定
精密吸取25ml上述处理后的样品溶液, 移入用黑纸(布)包扎的60ml分液漏斗中。另精密吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mlBHT标准使用液(相当于0、10、20、30、40、50 μgBHT), 分别置于黑纸(布)包扎的60ml分液温斗，加入50%甲醇至25ml。分别加入5ml邻联二茴香胺溶液，混匀，再各加2ml0.3%亚硝酸钠溶液，振摇1min，放置10min，再各加10ml三氯甲烷，剧烈振摇1min，静置3min后，将三氯甲烷层分入黑纸(布)包扎的10ml比色管中，管中预先放入2ml甲醇，混匀。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长520nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。
5 计算
A × 1000
X = ──────────────
m × V2/V1 × 1000 × 1000
式中: X──样品中BHT的含量，g/kg;
A——测定用样液中BHT的含量，μg;
m──样品质量，g;
V1——蒸馏后样液总体积，ml;
V2——测定用吸取样液的体积，ml。
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